巴布亞旋毛蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提

巴布亞旋毛蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提：

①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

2 RNA質(zhì)量檢測

1）紫外吸收法測定

先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。

① 濃度測定

A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為：A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

淡豆豉染料法PCR鑒定試劑盒

膽南星染料法PCR鑒定試劑盒

丹參染料法PCR鑒定試劑盒

淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒

黨參染料法PCR鑒定試劑盒

當(dāng)歸染料法PCR鑒定試劑盒

稻芽染料法PCR鑒定試劑盒

燈心草染料法PCR鑒定試劑盒

地膚子染料法PCR鑒定試劑盒

地骨皮染料法PCR鑒定試劑盒

地黃染料法PCR鑒定試劑盒

地龍染料法PCR鑒定試劑盒

地榆染料法PCR鑒定試劑盒

丁香染料法PCR鑒定試劑盒

冬蟲夏草染料法PCR鑒定試劑盒

冬瓜皮染料法PCR鑒定試劑盒

獨(dú)活染料法PCR鑒定試劑盒

杜仲染料法PCR鑒定試劑盒

莪術(shù)染料法PCR鑒定試劑盒

兒茶染料法PCR鑒定試劑盒

法半夏染料法PCR鑒定試劑盒

番瀉葉染料法PCR鑒定試劑盒

防風(fēng)染料法PCR鑒定試劑盒

防已染料法PCR鑒定試劑盒

榧子染料法PCR鑒定試劑盒

粉萆薢染料法PCR鑒定試劑盒

佛手染料法PCR鑒定試劑盒

茯苓染料法PCR鑒定試劑盒

覆盆子染料法PCR鑒定試劑盒

浮萍染料法PCR鑒定試劑盒